在一所临海别墅里，住着Charlie（查理·辛 Charlie Sheen 饰）和Alan（乔恩·克莱尔 Jon Cryer 饰）兄弟俩，一个是花花公子作曲家，身边总有穿梭不断的美女；一个是离婚后被老婆赶出来的按摩师，只能寄居在哥哥家里。这两个单身汉的生活里还有一个小小的“好汉”——Alan的儿子Jake（安加斯·T·琼斯 Angus T. Jones 饰），每到周末，Alan就会从前妻家里把Jake接到这所单身汉别墅。
　　值得一提的是几个不时在兄弟俩生活中露一把脸的配角，让兄弟两个对女人产生阴影的魔鬼老妈，刻薄的前妻，拽得要死的清洁女佣，还有和Charlie春宵一夜之后就跟踪了他两三年的邻居Rose。

　　在本季中，Tim Speedle离开了，而新人Ryan Wolfe则加入了小组。
　　Horatio Caine：David Caruso饰演，是迈阿密达德郡犯罪实验室的组长，曾经是拆弹小组的警官，现在是监识分析师。
　　Calleigh Duquesne：Emily Procter演，弹道科学家，出生于路易西安那州达尼尔（Darnell），西班牙语十分流利，曾在图兰大学（Tulane University）获得物理学学士学位。
　　Eric Delko：Adam Rodriguez饰演，指纹与药品辨识专家，土生土长于迈阿密，曾在迈阿密大学获得化学学士学位。父亲俄罗斯人，母亲古巴人，所以西班牙语和俄语都很流利。当情况需要时，达可在小组里通常是扮演蛙人的角色。
　　Alexx Woods：Khandi Alexander饰演，迈阿密达德郡的验尸官。她有一个古怪的习惯就是在验尸的时候跟尸体讲话，通常是想要让死者死后可以更为安详。
　　Ryan Wolfe：Jonathan Togo饰演，是一个想进入真实鑑识工作的基层巡逻员警。他了解到自己永远无法取代史毕的地位，只能尽力地成为小组的一员。沃夫首次出现在“Under the Influence”这一集，不过直到“Hell Night”这一集之后才变成常态演出。
　　Yelena Salas：Sofia Milos饰演，一个常常跟CSI一起调查的重案组探员，也是何瑞修弟弟雷蒙的遗孀。

　　在富裕的滨海小镇“海王星”，有权有钱的人们制定着游戏规则。他们拥有整个城镇，当然也包括镇上的高中，进行着各种不可告人的秘密勾当——不幸的是，小镇上还有一个名叫维罗妮卡（克里斯汀·贝尔 Kristen Bell 饰）的女孩，她聪明，无畏。故事发生在她的好友莉莉（阿曼达·塞弗里德 Amanda Seyfried 饰）被谋杀后。莉莉脑部受硬物重击，死在自己家游泳池边，她家是全镇最有权势的家族，因此此案件也引起了所有人的关注。维罗妮卡的父亲凯斯（安里科·克兰托尼 Enrico Colantoni 饰）是调查这件案件的警官，坚持称Lilly的父亲与此案件有关系，但却得不到大家的支持，最后只好引咎辞职。维罗妮卡受到了牵连，成为了学校最不受欢迎的人。为了维持生计，父亲开起了私人侦探所，而维罗妮卡则开始在学校帮同学查案子赚点家用……

　　故事以真人真事改编，讲述刑事警察局的法庭犯罪调查员如何在作案现场取得证据破案的故事。调查员的名言是“死尸会说话”，他们利用指纹、鞋印、子弹壳、血迹、毛发、纤维、尸体伤痕等微小证据，经过仔细的分析研究后，寻得破案的关键。解开谜团的过程颇有吸引力。此剧还重建死者被害时的现场，拍摄子弹如何在体内穿梭，血管、器官被破坏过程，逼真景观令人屏息。看了如此细致的破案手法，即使有犯罪的胆在以身试法时也要好好考虑

　　在普林斯顿大学附属医院内，坐镇一位大名鼎鼎的内科医师——格雷戈·豪斯（休·劳瑞 Hugh Laurie 饰），他穿着邋遢随便，手拄拐杖，刚愎自用，锋芒毕露，全然没有人们印象中那类谦和严谨的专业医师的影子。可是在这副令人咋舌的外表之下，却藏着令同行和病患佩服得五体投地的高超医术和丰富学识。豪斯医生治病的手法也独树一帜，他不当面问诊，也绝对不相信病患的道白感受，而完全凭借自己卓越的学识和高超的推理能力解决了诸多疑难杂症。
　　在神经科医师泰勒·埃瑞克·弗曼（奥尔马·伊普斯 Omar Epps 饰）、免疫学专家阿丽森·卡梅隆（珍妮弗·莫里森 Jennifer Morrison 饰）、心脏与急诊科医师罗伯特·蔡斯（杰西·斯宾塞 Jesse Spencer 饰）的协助下，豪斯团队绽放出耀眼夺目的光芒，也创造了一个又一个医学奇迹……

　　第三季的焦点重回到活跃于街头的Barksdale团伙，同时也将视角扩展到政治领域。此外，本季当中引入Hamsterdam这一新支线剧情，以探讨在部分人烟稀少的街区对非法毒品交易及卖淫的「事实性」合法化会有怎么样的潜在积极作用。这种做法在阿姆斯特丹和其他欧洲城市取得了积极成果，减少了市内的街头犯罪。这些都是对早先情节的延续。